Hypersil液相色谱柱是什么东西
点击次数:1215 更新时间:2021-05-12
Hypersil液相色谱柱是什么?色谱是分离分析的一种手段,分离是核心,因此扮演分离作用的色谱柱是色谱系统的核心。色谱柱的要求是:柱的效率高,选择性好,而分析的速度高。用于HPLC的市售各种颗粒填料为多孔硅胶,基于二氧化硅的键合相,氧化铝,有机聚合物微球(包括离子交换树脂),多孔碳等。粒径通常为3、5、7、10um等。柱的理论值可以达到每米50,000至160,000。对于一般的分析,只需要5000个板就可以达到柱的效果;对于同源分析,仅500个就足够了;对于更困难的分离物质对,最多可以使用20,000柱。因此,柱的长度通常约为10到30cm,可以满足复杂混合物分析的需要。
柱的效率受柱的内部和外部因素影响。为了获得色谱柱的最佳效率,除了柱之外的死体积小之外,还需要一种合理的柱结构(穷举,可以减少填充床外部的死体积)和包装技术。即使采用*填充技术,柱中心的填充条件和沿管壁的零件始终是不同的。管壁附近的零件较松散,容易形成通道,流速较快,这会影响冲洗剂的流动形状。为了扩大范围,这就是管壁效应。该管壁面积是从管壁内部开始的材料直径厚度的大约30倍。在一般的液相色谱系统中,柱外部效应对柱效应的影响远大于管壁效应。
色谱柱分为两种:分析型和制备型
①常规分析柱(恒定柱),内径2~5mm,柱长10~30厘米;
②窄径柱(内径),内径1~2mm,柱长10~20cm;
③毛细管柱,内径0.2~0.5mm;
④半制备的柱,内径>5mm;
⑤实验室准备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;
⑥生产准备柱内径可以达到几十厘米。
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20um时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20um时,湿法填充较为理想。填充方法一般有四种:
①高压匀浆法,多有用于分析柱和小规模制备柱的填充;
②径向加压法;
③轴向加压法,主要用于装填大直径柱;
④干法,柱填充的技术性强,大多数实验室使用己填充好的商品柱。
高效液相色谱柱的获得,装填技术是关键环节,但根本问题还在于填料本身性能的优劣,以及配套的色谱仪系统的结构是否合理。