怎么用Kromasil系列液相色谱柱怎么分析复杂样品?
点击次数:774 更新时间:2022-08-29
Kromasil系列液相色谱柱是色谱分析过程中重要的部分,相当于人体的“心脏”。根据自己要分析的样品去选择合适的液相色谱柱,需要考虑不同参数将会造成什么影响,比如粒径、酸碱性、极性和分子量大小等。
即使是液相色谱柱也分很多类型,比如正相、反相、C18柱、亲水性色谱柱等等。只有了解影响分析柱性能的因素,才能结合目标分析物的性质、需要达到的分析效果及实验室条件来选择适合的色谱柱。
Kromasil系列液相色谱柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立平衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辨率降低,重现性不好。
因此对于复杂样品需要准确分离,要使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就要使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
现代液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,要对此有一定的认识和了解。