对液相色谱柱平衡的探讨
点击次数:1402 更新时间:2021-04-19
液相色谱柱包括反相色谱柱、阴离子交换树脂色谱柱、阳离子交换树脂色谱柱和离子分离色谱柱。用于反相分离的还有两种二氧化硅基C8和C18色谱柱。液相色谱柱通常由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。
液相色谱柱在使用前需进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
液相色谱柱的平衡说明:
反相柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得大的“补偿”,而且色谱柱的寿命也会变得更长,具体操作步骤如下:
1.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)。
2.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水“过渡”即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。