日本昭和电工液相色谱柱失效的原因分析
点击次数:1536 更新时间:2021-03-17
日本昭和电工液相色谱柱根据样品不同,除了HILIC模式外,也能利用反相模式,离子交换模式进行分离。填料键合二元醇基提高了亲水性,使用HILIC模式进行分离,尺寸排阻模式比原先的HILIC色谱柱更适用于寡糖的各聚体分离。
日本昭和电工液相色谱柱失效的几大因素:
1.压力因素
液相色谱柱使用过程中的骤然压力波动、机械撞击或温度骤然变化都会对色谱柱床层产生影响,导致峰形变差和柱效降低。进样过程中,进样阀转动太慢可引起压力波动,使色谱柱床产生裂隙,在柱切换时也存在同样的问题。使用填充良好的色谱柱,在较低柱压下操作,可大大减少由压力波动造成的色谱柱损坏。
2.强保留样品组分
强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上,能严重地影响液相色谱柱寿命。像生物组织或体液的提取物、天然产物等复杂样品,易造成柱头的污染。相对较纯的样品,一般不会出现这一问题。色谱柱应用中,色谱峰严重拖尾或分裂往往是强保留污染物在柱头吸附的体现。
3.筛板堵塞
色谱柱入口筛板堵塞是液相色谱仪较常见的问题之一,会导致柱压升高、色谱峰拖尾、塔板数降低等问题。通常分析样品中微粒杂质较右可能堵塞色谱柱入口,因此分析时需要先过滤或者离心,乳浊或浑浊样品应以0.25µm滤膜处理,也可用针头过滤器过滤。进样器与泵密封垫的磨损也会带入微粒,在进样阀与色谱柱之间使用0.25µm或0.45µm的在线过滤器,通常可以避免这类问题。
4.装填不良
装填不良的色谱柱,在短时间应用后,填充床的压缩通常使柱头处产生塌陷,导致柱效突然降低。液相色谱柱的初始评价指标,如塔板数、不对称因子等往往不能很好地表征色谱柱床层的稳定性,这种情况只能在实际应用中发现。