【2015版中国药典-中药篇】野菊花分析

■《中国药典》收载情况

【来源】　本品为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。秋、冬两季花初开放时采摘，晒干，或蒸后晒干。
【功能与主治】　清热解毒，泻火平肝。用于疔疮痈肿，目赤肿痛，头痛眩晕。
【含量测定】　蒙花苷照液相色谱法（通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（26:23:1）为流动相；检测波长为334 nm。理论板数按蒙花苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备：取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇（必要时加热）制成每1 mL含25μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100 mL，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 µL，注入液相色谱仪，测定，即得。

■野菊花药材液相色谱方法的建立

【色谱行为描述】
　　《中国药典》中野菊花的含量测定以蒙花苷为质量评价依据，蒙花苷在InertsilODS-3（4.6×250mm，5μm）中的色谱行为是：在流动相组成为甲醇-水-冰醋酸系统时，流动相的比例对蒙花苷及其相邻色谱峰的分离度有一定影响，流动相比例为甲醇：水：醋酸=52:46:2时，其分离效果与分析时间合适，选择甲醇的比例在48%~57%（v/v）之间均可获得较好的分析效果；柱温对蒙花苷的保留时间及其相邻色谱峰的分离度有微小影响，经考察建议温度为30℃；流动相中醋酸对蒙花苷的分离度及拖尾因子均无明显影响，但对分析时间有一定的改变，在醋酸浓度2%（pH=2.01）时较为合适。推荐流动相配比范围：甲醇：水：冰醋酸（48~57）：（41~51）：（1~5），柱温范围：25~35℃。综上所述，经考察在流动相甲醇-水-冰醋酸比例为52:48:2，柱温30℃的色谱条件下能得到较满意的分析效果。
　　野菊花在上述色谱条件下，采用Shim-pack VP-ODS色谱柱表现出和Inertsil ODS-3色谱柱相似的色谱行为，保留时间和柱效相当。
样品来源：　本品为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。秋、冬两季花初开放时采摘，晒干，或蒸后晒干。
对照品：　蒙花苷（成都曼斯特生物科技有限公司，批号：MUST-15101207，含量：99.51%）
对照品溶液的制备：　取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇（必要时加热）制成每1 mL含25μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：　取本品粉末(过三号筛)约0.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100 mL，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

推荐使用色谱条件：		仪器配置：
色谱柱：	InertsilODS-3 (4.6×250 mm，5 μm )	LC-20AD 高压泵
流动相：	甲醇-水-冰醋酸（26:23:1）	SPD-10AVP紫外可见光检测器
柱温：	30℃	DGU-20A3脱气机
检测波长：	334nm	CTO-10ASVP柱温箱
流速：	1.0mL/min	SIL-10ADVP 自动进样器
进样量：	20μL
*此条件同样适用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250 mm, 5 μm)，相关谱图见附注1。

■蒙花苷对照品溶液：

■供试品溶液：

■蒙花苷标准曲线：

■蒙花苷的重复性：

序号	对照品（10μL）		样品（20μL）
序号	t/min	峰面积	t/min	峰面积
1	13.041	1320558	12.924	1442579
2	13.083	1316741	12.950	1431804
3	13.020	1317305	13.013	1427972
平均值	13.048	1318201	12.960	1434118
RSD/%	0.24	0.16	0.35	0.53