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对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?
新的色谱柱的活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为,分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单,多进几次样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。
如果要加快平衡时间,把前面用来平衡的进样样品浓度加大,或者不等洗脱完成,连续进样多针。用待测物对新柱平衡,目的是:将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。